La relación de absorciones a 260 nm frente a 280 nm se usa comúnmente para evaluar la contaminación del ADN de las soluciones de proteínas, ya que las proteínas (en particular, los aminoácidos aromáticos) absorben la luz a 280 nm. Sin embargo, lo contrario no es cierto: se necesita una cantidad relativamente grande de contaminación de proteínas para afectar significativamente la relación 260: 280 en una solución de ácido nucleico.
La relación 260: 280 tiene una alta sensibilidad a la contaminación por ácido nucleico en proteínas
% proteína,% ácido nucleico relación 260: 280
100 0 0.57
95 5 1,06
90 10 1.32
70 30 1.73
La relación 260: 230 carece de sensibilidad para la contaminación de proteínas en ácidos nucleicos.
Esta diferencia se debe al coeficiente de extinción mucho más alto que tienen los ácidos nucleicos a 260 nm y 280 nm, en comparación con el de las proteínas. Debido a esto, incluso para concentraciones relativamente altas de proteína, la proteína contribuye relativamente poco a
a la absorbancia 260 y 280. Si bien la contaminación de proteínas no puede evaluarse de manera confiable con una relación de 260: 280, esto también significa que contribuye con un pequeño error a la estimación de la cantidad de ADN.
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