¿En qué circunstancias y por qué se prefiere el caldo excelente al caldo LB para el crecimiento de E. coli?

He encontrado E. coli K-12 TG1 saturado a alrededor de OD600 ≈ 6 en LB y OD600 ≈ 18–20 en TB. Diferentes cepas, diferentes puntos de saturación, pero típicamente tres veces más densos en TB que en LB. Excelente para obtener cultivos de alta densidad para la sobreproducción de proteínas.
Aunque solo produce tres veces más células por volumen, el documento original dice que produce de 4 a 7 veces más ADN, según el número y el tamaño de la copia. [1]

Un documento más riguroso que crea un medio de producción de plásmido óptimo confirma que encontrar TB da cuatro veces el rendimiento volumétrico del plásmido pUC19 en relación con LB, pero al 65% del costo, también mejor en ambos aspectos en relación con SOC [2]. Sin embargo, su medio optimizado, llamado PDM (R), era dos veces más rentable que la tuberculosis.

Otro artículo encontró que la TB mejora los rendimientos de plásmidos de copia única / media, y que cuando la concentración de extracto de levadura de LB aumenta a 24 g / L en TB en lugar de los 5 g / L normales, coincide con el rendimiento de ADN de TB [3]. LB³⁰ excedió el rendimiento de plásmido de TB y, por lo tanto, es quizás el medio de producción de plásmido rentable más fácil de fabricar (a diferencia de PDMR). Por lo tanto, el buffering de TB y el glicerol no importan. Sin embargo, para LB³⁰, podría agregar magnesio.

LB es un medio bastante irracional en muchos aspectos, y este gran artículo explica por qué, sobre todo por su falta de una buena fuente de carbono y limitación de magnesio: las limitaciones del medio LB. No deben hacerse afirmaciones sobre la fisiología de E. coli a partir de células cultivadas en LB.

Un buen artículo sobre los medios de producción de plásmidos: Pimp Your Plasmid Growth Medium

Notas al pie

[1] http://bio.wayne.edu/profhtml/Cu…

[2] http://www.sciencedirect.com/sci…

[3] Mejora de los rendimientos de ADN plasmídico de número de copia bajo y único de células de Escherichia coli

“Terrific Broth contiene un poco más de Bacto® Tryptone para aminoácidos
que LB, pero casi 5 veces el extracto de levadura Bacto®, que suministra grandes
cantidades de factores de crecimiento y precursores de ácido nucleico. TB también
contiene tampón fosfato para mantener un pH fisiológico durante
crecimiento exponencial y glicerol (que no se metaboliza en láctico
ácido) a una concentración no limitante de la velocidad. Las bacterias crecen más y
lisar más lentamente, aumentando la cantidad de ADN plasmídico recuperado.
El almacenamiento en búfer tiende a ser necesario si los medios contienen una fuente de carbono, como
glucosa, que se convierte en ácidos orgánicos (acetato) en lugar de
metabolismo aeróbico O si el carbono tiene que descansar de un típico
fuente de nitrógeno, como proteína (como en el caso de Super Broth) que
da como resultado un aumento del pH a medida que se eliminan las aminas. Tris es un buen amortiguador pero
normalmente se usa un sistema de tampón fosfato (aunque TUBOS y MOPS son
utilizado en formulaciones de medios mínimos). Dando una disponibilidad más fácil
la fuente de carbono, como el glicerol, también mejoraría los medios “.
– de http://www.biology-protocols.info

El caldo excelente produjo valores de crecimiento significativamente más altos para la gonorrea de Neisseria, incluso en comparación con el agar suplementado.

Llegó al laboratorio recientemente. Probará el crecimiento en la próxima semana.