La digestión por restricción es la forma de cortar los átomos de ADN en pedazos más pequeños con catalizadores poco comunes llamados endonucleasas de restricción (de vez en cuando se denominan enzimas de restricción o RE).
Los Digests de Confinamiento comienzan mezclando el ADN y el RE, sin embargo, lamentablemente no es tan básico como eso. Las enzimas de confinamiento son sensibles y deben tratarse con precisión.
Como los químicos son proteínas y las proteínas se desnaturalizan a medida que la temperatura se expande, los RE se guardan constantemente en un refrigerador hasta el punto en que se utilizan. A decir verdad, la mayor parte de las fijaciones en un Restriction Digest son hielo continuo hasta que es la oportunidad ideal para que comience la respuesta. Las condiciones de respuesta genuinas cambian comenzando con un compuesto y luego con el siguiente, e incorporan temperatura, fijación de NaCl así como de MgCl2, pH, etc. Estos factores, aparte de la temperatura, se mejoran al mezclar el químico y el ADN con un soporte particular para la proteína de decisión.
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Cuando cada una de las fijaciones se mezclan en el tubo de respuesta, el tubo se trama a la temperatura ideal de la enzima de restricción durante 1 hora o más. En ese punto, por fin, cuando el proceso ha seguido funcionando durante el tiempo adecuado, el tubo de respuesta se devuelve en hielo para evitar la corrupción inespecífica de su ADN. Una vez que finaliza el resumen de restricción, se realiza una electroforesis en gel de agarosa para aislar las secciones del proceso midiendo y visualizando las partes y tal vez purgándolas para análisis adicionales.
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