Todos los factores que intervienen en la creación del arte del ADN realmente dependen del material con el que está trabajando (es decir, la secuencia de ADN), la disponibilidad y la facilidad de agregar etiquetas fluorescentes a los cebadores apropiados, y la disponibilidad de los cebadores en primer lugar.
Menciona que comprende el proceso general, por lo que se ha dado cuenta de que necesita fragmentos de ADN de diferentes tamaños etiquetados con diferentes cebadores fluorescentes para obtener ese tipo de arte. Necesita saber lo que está haciendo antes de hacerlo.
Una vez que sepa cómo quiere que se vea, necesita calcular el tamaño de los fragmentos y el voltaje aplicado a través del gel. Una vez que conozca los tamaños de los fragmentos, debe poder digerir algo de ADN para obtener esos tamaños de fragmentos. Una vez que haya digerido el ADN, necesita cebadores específicos para cada tamaño de fragmento y / o línea, y una forma de etiquetar fluorescentemente esos cebadores.
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Alternativamente, puede clasificar los fragmentos en cómo desea que se vean por color y ubicación (no solo la distancia por el carril, sino en qué carril se encuentra). A partir de ahí, puede averiguar qué cebadores son más fáciles de etiquetar en esos colores y luego buscar un fragmento del tamaño apropiado que será digerido por una enzima determinada y permitirá que el cebador se adhiera.
Entonces, el orden de los pasos depende de usted. Sin embargo, se debe investigar mucho antes de que pueda hacer que las cosas sucedan.
Considere consultar a un genetista en una universidad cercana para ver si pueden ayudarlo. Es probable que sepan qué patrones de digestión deben buscar, dónde obtener los cebadores [hechos], qué cebadores son mejores para el marcado fluorescente y otros trucos del comercio de electroforesis en gel.
