¿Qué es la taxonomía molecular? Describa el método de hibridación de ADN – ADN para la identificación bacteriana.

Taxonomía Molecular:

Es la clasificación de los organismos en función de la distribución y composición de las sustancias químicas en ellos.

Hibridación ADN-ADN:

Cuando dos organismos comparten muchos genes idénticos o muy similares, se espera que sus ADN se hibridicen en proporción aproximada a las similitudes en sus secuencias de ADN. Por esta razón, la medición de la hibridación ADN-ADN entre los genomas de dos organismos proporciona un índice aproximado de su similitud entre sí. La hibridación ADN-ADN, por lo tanto, es útil para diferenciar entre organismos como complemento de la secuenciación de genes de ARNr de subunidades pequeñas. En un experimento de hibridación, el ADN genómico aislado de un organismo se hace radioactivo con fósforo radiactivo (32P) o tritio (3H), se corta a un tamaño relativamente pequeño, se calienta para separar las dos cadenas y se mezcla con un exceso de ADN sin marcar preparado en de la misma manera desde un segundo organismo (Figura 16.20). La mezcla de ADN se enfría para permitir que las cadenas individuales se vuelvan a unir. El ADN bicatenario se separa de cualquier ADN no hibridado restante. Después de esto, se determina la cantidad de radiactividad en el ADN hibridado y se compara con el control, que se toma como 100% (Figura 16.20). Varios sistemas de etiquetado de ADN no radioactivos también están disponibles.

La hibridación ADN-ADN es un método sensible para revelar diferencias sutiles en los genomas de dos organismos y, por lo tanto, a menudo es útil para diferenciar organismos muy similares. Aunque no existe una convención fija sobre cuánta hibridación entre dos ADN es necesaria para asignar dos organismos al mismo rango taxonómico, se recomiendan valores de hibridación de 70% o más como evidencia de que dos aislamientos son la misma especie. Se requieren valores de al menos el 25% para argumentar que dos organismos están en el mismo género (Figura 16.20c). Los ADN de organismos relacionados más distantes, por ejemplo, Clostridium (gram-positivo) y Salmonella (gram-negativo), se hibridarían solo a niveles de fondo, 10% o menos.