El ensayo de proximidad de centelleo es una técnica que nos permite un rendimiento rápido y automático de experimentos relacionados con las interacciones proteína-droga o proteína-proteína y varias otras. En SPA, se utilizan perlas de gel hechas de poliestireno.
Estas perlas de poliestireno están hechas de tal manera que tendrán flúor incorporado y la enzima o proteína objetivo que se uniría al fármaco o alguna otra proteína de interés. Estas perlas se transfieren a una solución de fármaco o proteína radiomarcada. Si la molécula de interés, es decir, el fármaco o la proteína, tiene alguna afinidad por la enzima o proteína unida a la perla, entonces interactuará y se unirá a esa enzima.
Llevaría el fármaco o la proteína radiomarcada a una proximidad del flúor que está intacto en la cuenta. La radiación (generalmente partículas β débiles) excitará el flúor para emitir fluorescencia que puede ser detectada por un espectrofluorómetro.
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Imagen [1]
Por lo tanto, a partir de los resultados SPA, podemos concluir que el fármaco o la proteína de interés se unirá a la enzima o proteína objetivo si se observa fluorescencia.
Referencia y lecturas sugeridas:
- Wilson, K. y Walker, J. eds., 2010. Principios y técnicas de bioquímica y biología molecular . Prensa de la Universidad de Cambridge.
- Hart, H., 1981. Ensayo de proximidad de centelleo . Patente de Estados Unidos 4.271.139.
- Bosworth, N. y Towers, P., 1989. Ensayo de proximidad de centelleo. Nature , 341 (6238), pp.167-168.
- Hart, H., 1983. Ensayo de proximidad de centelleo . Patente de los Estados Unidos 4.382.074.
Notas al pie
[1] Imagen en ggsrv.com
