¿Por qué se usa un intrón en la secuenciación?

Hmm, no estoy muy seguro de lo que quieres decir aquí. Hay varias opciones:

1) En la secuenciación regular de Sanger o qPCR donde solo desea secuenciar o amplificar ADNc (a partir de ARNm), es deseable diseñar sus cebadores a través de intrones (en una unión de empalme). De esta manera, el cebador no puede unirse al ADN genómico (donde el intrón no se ha empalmado). Esto permitirá una secuenciación o amplificación limpia incluso en presencia de rastros de ADN genómico. Por el contrario, puede diseñar el cebador en el intrón mismo (que no debe estar presente en una preparación de ADNc limpia) para detectar la contaminación del ADN genómico (esto puede ser útil ya que algunos genes no tienen intrones, por lo que se mide el nivel de señal que viene de ADN genómico sería útil).

2) En la secuenciación de la próxima generación, donde se ha secuenciado el genoma completo, es común hacer una secuenciación completa del exoma para ahorrar tiempo y dinero. Esto dejará los intrones (en gran parte) sin secuenciar. Para obtener una explicación de por qué desea secuenciar los intrones, consulte mi respuesta anterior a esta pregunta: ¿Qué información adicional podemos obtener actualmente de una secuenciación completa del genoma versus (solo) secuenciación del exoma?

Las secuencias de intrones (hacia arriba y hacia abajo del exón) se usan como espaciadores entre los lados de fijación del cebador y la señal de secuencia de bajo ruido y legible. Y con esto, asegúrese de que los sitios de empalme estén cubiertos. Las mejores prácticas incluyen la secuencia 20nt 5 ‘y 3’ del exón.
El punto de ramificación real es a menudo desconocido y, por lo tanto, ignorado.
Al usar MPS / NGS, se siguen las mismas mejores prácticas, aunque a menudo se observa que escabullirse a +/- 10nt mantiene los resultados viables.
En segundo lugar (menos importante), mejora la señal al ruido de la PCR ya que los pseudoges con variantes de ADN no relevantes no contienen intrones.

Primero, sabemos que la mutación tiene una ración constante. y la longitud de un gen se decide por la longitud de los intrones (porque los intrones son mucho más largos que los exones). Entonces los intrones funcionan como amortiguadores en la mutación genética.

En segundo lugar, algunos microARN están codificados por intrones.