Si tiene una secuencia de: GTACGCATCGATGCATGG GATTCTCATAGCAGAGAAGTTTCGCGCGCAAACCGCAGCATT TTCGTCTCATCATCCCTATA
Una introducción directa podría ser: GTACGCATCGATGCATGG>
Esto se une a la primera sección en negrita. Un cebador directo es una cadena sencilla de ADN de 15 a 100 pb. Lo más importante acerca de un cebador es asegurarse de que se unirá complementariamente a su secuencia de ADN objetivo. Si se hace correctamente (se incluyen suficientes bases) y la longitud es buena, la imprimación debe unirse solo en un lugar: donde lo desee.
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Se puede usar para secuenciar (para averiguar la secuencia de cosas que vienen después en> dirección, o 5 ‘a 3’. Lo más probable es que se use un cebador directo para PCR. Sin embargo, para hacer PCR, necesita una cartilla inversa.
Una cartilla inversa podría verse así: TATAGGGATGATGAGACGAA>
Tenga en cuenta que esto no coincide con la secuencia que he proporcionado. Esto se debe a que el ADN es bicatenario, por lo que si desea cebar en la dirección opuesta, debe complementar las bases y leer en la dirección opuesta.
5 ‘ATGC 3’ se convierte en:
El | El | El | El |
3 ‘TACG 5’
¿Te das cuenta de cómo son gratuitos? Ahora, léalo de 5 ‘a 3’, y tendrá su cebador inverso.
Si realizó la PCR con estos dos cebadores, amplificaría todo el fragmento: GTACGCATCGATGCATGG GATTCTCATAGCAGAGAAGTTTCGCGCGCAAACCGCAGCATT TTCGTCTCATCATCCCTATA