Este es un tema muy extenso y usted solo ha brindado la información más básica.
Fase inversa o cromatografía en fase normal?
¿Cuál es el valor de pKa del compuesto objetivo?
- ¿Cómo modelamos la interacción entre compuestos químicos? (y elementos)
- ¿Qué sal se produce al agregar amoniaco acuoso al dióxido de azufre acuoso hasta que sea solo alcalino?
- ¿Qué determina el pH?
- ¿Por qué el benceno es extra estable a pesar de tener 3 dobles enlaces?
- ¿Cómo se puede predecir qué isómero de una fórmula se producirá a partir de una reacción particular?
¿Cuál es el pH y la composición de su fase móvil?
¿Es un método isocrático o un gradiente?
¿Cuál es la columna estacionaria fase y dimensiones?
¿Cuál es su temperatura de muestra y columna?
La separación es una función de afinidad entre la fase estacionaria y la móvil. La separación pobre se debe a una afinidad muy similar. Algunas herramientas comunes que pueden ayudar a resolver o separar componentes. Los básicos que aumentarán el tiempo de ejecución.
- Reducir el caudal
- Reducir la temperatura de la columna
- Aumentar la longitud de la columna
Métodos más sofisticados que podrían mejorar la separación mientras se mantiene o reduce el tiempo de ejecución.
- Variar el pH de la fase móvil.
- Varíe la composición de la fase móvil ajustando la relación y / o el tipo de orgánico.
- Si no está ejecutando un gradiente, mire hacerlo
- Si está ejecutando un gradiente, entonces varíe los parámetros de gradiente alrededor del área del problema.
Si este es un método establecido, entonces tendría que validar cualquier cambio que haya mejorado el método. Le recomendaría que mire los cursos de desarrollo y validación de métodos que pueden estar disponibles para usted. La mayoría de los principales fabricantes de HPLC ofrecen estos. Hay algunos recursos en línea muy buenos, como chromacademy [1] o foros de LinkedIn.
Notas al pie
[1] capacitación hplc para el químico analítico l CHROMacademy.com
