La cromatografía líquida de alto rendimiento ( HPLC ; anteriormente conocida como cromatografía líquida de alta presión ), es una técnica en química analítica utilizada para separar, identificar y cuantificar cada componente en una mezcla. Se basa en bombas para hacer pasar un disolvente líquido presurizado que contiene la mezcla de muestra a través de una columna llena de un material adsorbente sólido. Cada componente en la muestra interactúa de manera ligeramente diferente con el material adsorbente, causando diferentes velocidades de flujo para los diferentes componentes y conduciendo a la separación de los componentes a medida que fluyen fuera de la columna.
La HPLC se ha utilizado para la fabricación ( por ejemplo, durante el proceso de producción de productos farmacéuticos y biológicos), legal ( por ejemplo, detección de fármacos para mejorar el rendimiento en la orina), investigación ( por ejemplo, separación de los componentes de una muestra biológica compleja o de productos químicos sintéticos similares entre sí) ) y con fines médicos ( por ejemplo, detectar niveles de vitamina D en el suero sanguíneo).
La cromatografía se puede describir como un proceso de transferencia de masa que implica adsorción. HPLC se basa en bombas para pasar un líquido presurizado y una mezcla de muestra a través de una columna llena de adsorbente, lo que lleva a la separación de los componentes de la muestra. El componente activo de la columna, el adsorbente, es típicamente un material granular hecho de partículas sólidas ( por ejemplo , sílice, polímeros, etc.), de 2 a 50 μm de tamaño. Los componentes de la mezcla de muestra están separados entre sí debido a sus diferentes grados de interacción con las partículas adsorbentes. El líquido presurizado es típicamente una mezcla de solventes ( por ejemplo , agua, acetonitrilo y / o metanol) y se conoce como una “fase móvil”. Su composición y temperatura juegan un papel importante en el proceso de separación al influir en las interacciones que tienen lugar entre los componentes de la muestra y el adsorbente. Estas interacciones son de naturaleza física, como hidrofóbicas (dispersivas), dipolo-dipolo e iónicas, con mayor frecuencia una combinación.
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