ZFN, TALEN y (posiblemente) morfolinos, aunque los ZFN ya fueron obsoletos por TALENS, pero todavía se usan un poco.
ZFN: nucleasas de dedos de zinc: estos tipos son enzimas de restricción hechas en laboratorio y requieren la presencia de dominios especiales de unión al ADN de dedos de zinc, vienen con muchos efectos fuera del objetivo y son muy ineficientes.
TALEN: nucleasas efectoras de tipo activador de la transcripción. Idea similar a las ZFN, pero también vienen con problemas similares. Son un poco más eficientes, pero no por mucho.
- ¿Cómo se determina la ubicación de un gen en un gen?
- ¿Cómo se puede describir la fórmula molecular de la nicotina?
- ¿Qué importancia tiene el control motor fino en microbiología molecular y biología de infecciones?
- ¿Cómo funciona el empalme de ARN?
- Una vez que el proceso de edición de genes CRISPR-Cas9 sea refinado y entendido, ¿habrá un límite en la cantidad de modificaciones postnatales que podríamos hacernos?
Morpholino- OK, esto no es exactamente una tecnología de edición de genes. Se utiliza para crear “derribos” genéticos utilizando una molécula de ARN que interfiere con la expresión. Después de unos días, el ARN se degrada y ya no tiene efecto. Se utilizan principalmente para estudiar el desarrollo temprano y temprano. Pueden continuar utilizándose por un tiempo porque son más fáciles que crear una línea transgénica. Sin embargo, nunca confié en ellos … hacen cosas funky.
Y una nota final sobre una estrategia particular que se usaba en mi antiguo laboratorio: las trampas genéticas. Las trampas de genes son una forma realmente ordenada de mutagenizar el genoma al azar utilizando el sistema GAL4-UAS. Usando un transposón, uno puede “saltar” al azar una trampa de genes al genoma y esperar que aparezca en algún lugar interesante. Nuestras trampas de genes contienen GAL4, GFP y un poli (a), flanqueado por tol2. La idea es que si aterriza en un gen, la maquinaria transcripcional formará una proteína de fusión para expresar su GFP para la visualización, mientras que su poli (a) termina la transcripción del gen endógeno. Es ordenado, pero aleatorio, y requiere un equipo de estudiantes de pregrado constantemente para encontrar algo interesante.
