Las hormonas utilizadas en cultivos de tejidos vegetales están principalmente disponibles en forma de polvo. Las cantidades requeridas son tan pequeñas que prácticamente no es adecuado pesar el polvo requerido para hacer un litro del medio. Por lo tanto, es aconsejable preparar una solución madre de hormonas.
Es una buena práctica preparar una solución madre de 1000 ppm, lo que significa que disuelve 1 gramo de polvo de hormonas y lo hace hasta 1000 ml (1 litro). Más adelante explicaré por qué es una buena práctica tener un stock de 1000 ppm.
Las auxinas (NAA, IAA, IBA, etc.) se disuelven en alcohol absoluto O alcohol etílico y NaOH o KOH diluido.
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Las citoquininas (6-BA o BAP, cinetina, TDZ, etc.) se disuelven en HCl diluido o NaOH diluido, mientras que la zeatina se disuelve en alcohol etílico.
Entre las giberelinas, GA3 se disuelve solo en agua destilada.
Procedimiento:
En primer lugar, pese exactamente 1 gramo (o use la cantidad completa en un paquete de botella de un gramo, esto es más conveniente) llevándolo a un matraz volumétrico de 1 litro de capacidad. Agregue una pequeña cantidad de agua destilada y unas pocas gotas de cualquiera de los siguientes: alcohol absoluto O alcohol etílico O HCl diluido O NaOH diluido O KOH diluido, y agite el matraz hasta obtener una solución transparente. Si está obteniendo un líquido blanco brumoso, agregue unas gotas más de alcohol etílico, hasta obtener un líquido transparente. Ahora complete el volumen a 1 litro agregando agua destilada.
Tomemos un ejemplo:
Si necesita preparar una solución madre de 500 ml de 1000 ppm de 6-BA, pese 0,5 gramos de polvo de 6-BA y disuélvala en una pequeña cantidad de agua destilada y HCl diluido o NaOH diluido y complete el volumen a 500 ml con agua destilada . Esta es una solución madre de 1000 ppm.
Ahora, suponga que desea hacer un medio de un litro con 5 ppm de 6-BA, solo tiene que extraer 5 ml de esta solución madre y agregarla a las otras reservas de nutrientes agregue un agente gelificante (agar / gelatina o cualquier otro) y proceder a hervir. Por lo tanto, si tiene una solución madre de las hormonas de 1000 ppm, la preparación de los medios se vuelve mucho más fácil, ya que no tiene que calcular nada.
Los mejores deseos para sus experimentos, ¡comparta sus experiencias y observaciones!
