¿Qué ventaja tiene la polimerasa Taq sobre las formas anteriores de polimerasa?

Taq se refiere a Thermus aquaticus , la especie de bacteria termofílica de la que se aísla la enzima. La única ventaja de Taq sobre las polimerasas convencionales es que no se desnaturaliza cuando se calienta a más de 90 ° C.

Como sabe, se usa en la PCR (reacción en cadena de la polimerasa) para hacer muchas copias de ADN de una sola o pequeña cantidad de moléculas de partida. En una mezcla de reacción que contiene el ADN objetivo, cebadores cortos de ADNss, los cuatro dNTP y la polimerasa Taq :

  1. Calentar a ~ 95 ° C para desnaturalizar la plantilla de ADN. Ahora tenemos dos ADNs monocatenarios complementarios.
  2. Baje la temperatura a ~ 50 ° C para que los cebadores cortos puedan recocer las hebras de ADN de la plantilla.
  3. Eleve la temperatura al óptimo para Taq (alrededor de 75 ° C) para que copie completamente los hilos de la plantilla.
  4. Repetir.

1–3 es un ciclo, y sirve para duplicar el número de copias de ADN bicatenario. Veinte ciclos producirían más de 1 millón de copias. Los cebadores y los dNTP se consumen estequiométricamente en el proceso. Use suficiente para el número de ciclos y la duración de su plantilla.

La polimerasa taq funciona a temperaturas bastante altas. Esto es imprescindible para la PCR porque los ciclos alcanzan los 95 grados Celsius. Si ponemos una polimerasa humana normal, se descompondrá y detendrá la función después de cada ciclo. Esto sería costoso y tedioso.