Gracias Nishat Shamima por A2A.
La tecnología de ADN recombinante es una técnica que cambia el fenotipo de un organismo (huésped) cuando se introduce un vector genéticamente alterado y se integra en el genoma del organismo. Entonces, básicamente, el proceso implica la introducción de una pieza extraña de ADN en el genoma que contiene nuestro gen de interés. Este gen que se introduce es el gen recombinante y la técnica se llama tecnología de ADN recombinante.
Proceso de tecnología de ADN recombinante
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La tecnología de ADN recombinante implica la selección del gen deseado para la administración en el huésped seguido de una selección del vector perfecto con el que el gen tiene que integrarse y formar ADN recombinante. Este ADN recombinante tiene que ser introducido en el huésped. Y, por último, debe mantenerse en el host y trasladarse a los descendientes.
Aislamiento de ADN:
Al ser un ácido nucleico encerrado dentro del núcleo, el aislamiento del ADN no es una tarea fácil. El aislamiento del ADN es un proceso enzimáticamente controlado en el que las células animales o vegetales se tratan con ciertas enzimas.
Las enzimas como la lisozima (bacterias), la celulasa (células vegetales) y la quitinasa (hongos) son diferentes enzimas que se utilizan para aislar un ADN puro de las células.
Fragmentación de ADN:
El ADN aislado y purificado se trata con endonucleasas de restricción que cortan el ADN en fragmentos. Las enzimas de restricción utilizadas en la tecnología de ADN recombinante desempeñan un papel importante en la determinación de la ubicación en la que se inserta el gen deseado en el genoma del vector. Las endonucleasas de restricción son secuencias específicas, que generalmente son secuencias de palíndromo y cortan el ADN en puntos específicos. Examinan la longitud del ADN y realizan el corte en el sitio específico llamado sitio de restricción. Los genes deseados y los vectores son cortados por las mismas enzimas de restricción para obtener las notas adhesivas complementarias, haciendo así que el trabajo de las ligasas sea fácil de unir el gen deseado al vector.
Amplificación del gen de interés:
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es un proceso para amplificar el gen una vez que se ha cortado el gen de interés apropiado usando las enzimas de restricción. A través de este proceso, se pueden producir múltiples copias del gen de interés. La PCR procede en tres etapas, desnaturalización, recocido y extensión .
Inserción de ADN recombinante en el huésped:
El huésped es la herramienta definitiva de la tecnología de ADN recombinante que toma el vector diseñado con el ADN deseado con la ayuda de las enzimas. La inserción del ADN recombinante deseado en el organismo huésped se puede lograr de varias maneras. Esto incluye: microinyección, biolística o pistola genética, enfriamiento y calentamiento alternativos, uso de iones de calcio, etc. Las células / organismos transformados con éxito transportan el gen recombinante a las crías.
Saludos
Parul
