Aprendí a enseñar pipeteo al volver a aprender a pipetear con mi mano no dominante cuando recibí un túnel carpiano en mi muñeca derecha debido al uso excesivo. Volver a aprender cómo pipetear te hace apreciar lo poco intuitivo que es el aparato y cuántos detalles de aprendizaje sutiles están involucrados con su uso.
Cuidar las pipetas suena como una versión diluida de cómo los soldados aprenden a usar y cuidar sus rifles. Sugiero mirar la excelente respuesta en ¿Cómo los soldados distinguen sus armas cuando se despliegan? ¿Incluso importa? Similar a los rifles, un conjunto de pipetas es el tipo de cosas donde el credo es verdadero.
“Esta es mi pipeta. Hay muchas como esta, pero esta es la mía. Mi pipeta sin mí es inútil. Sin mi pipeta, soy inútil”.
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El mejor primer paso es acostumbrarse al peso y la sensación de la pipeta sin líquidos. Creo que el P1000 es el mejor aparato para comenzar. Lleva un tiempo acostumbrarse a la acción de resorte del émbolo. La parte más complicada es obtener un buen indicador de dónde están las primeras y segundas paradas y cuánta resistencia ocurre en cada parada. Después de acostumbrarse al émbolo, lleva un tiempo reconocer cuánta presión se necesita para cargar una punta. Es bueno practicar cargar y expulsar puntas del eje. Haré esto cada vez que use o tome prestada una pipeta nueva.
Una vez que tenga una buena idea de la resistencia del émbolo y la velocidad que necesita para presionar y liberar el émbolo, hago que las personas comiencen con agua DI utilizando el 50% de la capacidad de la pipeta con punta de filtro. Los dos errores más comunes son probablemente establecer la punta demasiado profunda, lo que crea un vacío y la liberación demasiado rápido. Ambos errores harán que el líquido suba demasiado rápido y entre al eje donde podría causar corrosión. Me resulta útil observar cuidadosamente dónde va el líquido. Si realmente desea probar su precisión, puede cargar agua en una báscula y probar la precisión y precisión. Para cada punta, obtendré un buen indicador de cuánto líquido refleja un cierto volumen y qué biseles indican qué volumen. Si puede hacer agua, el etanol y el glicerol son buenos desafíos ya que sus viscosidades son muy diferentes. La velocidad y las resistencias son diferentes para esos líquidos, pero los volúmenes finales deberían ser los mismos.
También es muy útil observar todas las partes móviles de la pipeta. Regularmente desmonto, limpio y vuelvo a montar mi pipeta cada dos meses para evitar la oxidación y asegurar que las juntas tóricas hagan su trabajo. Mi Gilson P200 en la escuela de posgrado requiere que reajuste el eyector de punta cada semana.
Una de las cosas más difíciles de aprender con pipeteo es el arte de cargar geles. Ir demasiado profundo y la punta puede perforar el gel. Vaya demasiado rápido y la muestra puede filtrarse. Vaya demasiado superficial y la muestra no ingresará al pozo y se dispersará. Por lo general, es útil practicar cargar muestras vacías con tinte de carga para obtener un indicador de la profundidad a la que debe ir y qué tan lento necesita presionar la punta.
La tarea común final es la mezcla o resuspensión, que se conoce formalmente como triteración . Sí, hay un término académico para esto. Este es el tipo de cosas donde entre 2 estudiantes de posgrado habría 3 opiniones sobre el mejor método. Ver Pipetear daños en las células. En pocas palabras, es complicado y todos tienen opiniones sobre cómo hacer esto de la manera más eficiente sin destruir nada en el proceso. Cosas como el diámetro interno de la pipeta y si raspa o no los lados entran en juego.
Espero que la gente ahora aprecie los matices de pipetear. Hay muchos científicos que son increíblemente protectores de sus pipetas y pasan por grandes contramedidas para asegurarse de que nadie los tome prestados. Dadas todas las formas en que las pipetas pueden perder su precisión y exactitud, es comprensible.