¿Qué funciones juegan los dNTP en la PCR?

Los dNTP ( d exyxy n ucleotide t riphosphates) son los sustratos monoméricos para la reacción de polimerización. Es una mezcla de las cuatro unidades monoméricas, dATP, dTTP, dCTP y dGTP que finalmente formarán el ADN que se polimeriza durante la PCR. Cada una de las moléculas de dNTP contiene la base de ADN en una forma de trifosfato altamente energizada. Cada base se agrega a la cadena de ADN a través de un enlace fosfodiéster (un grupo fosfato entre cada base) y se libera una molécula de pirofosfato (dos fosfatos unidos entre sí), proporcionando la energía para la reacción de polimerización.

El objetivo de una PCR es amplificar una región del ADN. Para hacer eso, calienta el ADN para romper los enlaces de hidrógeno para que la doble hélice se descomprima. Y luego usas cada “mitad” de la hélice como plantilla y le agregas los nucleótidos para hacer dos nuevas copias del ADN. (Y luego calienta esas dos copias para descomprimirlas para crear cuatro cadenas individuales, usa esas cuatro cadenas como plantillas y agrega nucleótidos a esas cadenas de plantillas para hacer cuatro copias nuevas del ADN, y así sucesivamente).

Los dNTP son los nucleótidos que está agregando a sus cadenas de plantillas.

Los dNTP sirven como bloques de construcción para los nuevos hilos que se procesan durante la PCR. Cuando las muestras de ADN se desnaturalizan durante el proceso de calentamiento, básicamente crea un montón de moléculas de ADN monocatenarias. Los dNTP luego se unen a las bases libres que ahora están expuestas en las moléculas de SSDNA para crear nuevas copias completas de la molécula de ADN original que se está amplificando. Así es como se crean millones de copias nuevas a partir de la muestra original. Espero que esto haya ayudado!

El propósito de los desoxinucleótidos trifosfatos (dNTP) es suministrar los “ladrillos”. Dado que la idea detrás de la PCR es sintetizar una cantidad prácticamente ilimitada de un tramo específico de ADN bicatenario, las bases de ADN individuales deben suministrarse a la enzima polimerasa . Esto es obvio. Lo que podría no ser tan obvio es el hecho de que la reacción de PCR requiere energía. La única fuente de esa energía son los fosfatos β y γ de los dNTP individuales. Una sugerencia útil aquí: mientras que el tampón de PCR y el MgCl2 resistirán la congelación y descongelación repetidas, los dNTP son una historia diferente. Es mejor obtenerlos comercialmente como una mezcla dNTP de 10 mM y dividirlos inmediatamente en volúmenes de trabajo más pequeños, de modo que solo una fracción del suministro original de dNTP se descongele en cualquier momento. El resto permanece congelado hasta que sea necesario y no debería causar ninguna dificultad.

Estos son los monómeros de ácido nucleico que se polimerizan para formar productos de PCR por la actividad de la ADN polimerasa termoestable utilizada en las PCR actuales.

Los dNTP son la fuente de moléculas que la PCR une en un orden específico. Son los componentes básicos de la molécula de ADN.
Este es un video lindo y explica todas las partes importantes del ADN y su replicación.

Como el ADN se forma al unir los dNTP, la adición de dNTP en la reacción proporciona bloques de construcción para que las nuevas cadenas de ADN se copien durante la PCR.

Los dNTP son utilizados por la ADN polimerasa Taq para extender la longitud de las cadenas de ADN complementarias después de unirse a los cebadores

¿Qué funciones juegan los dNTP en la PCR?

Los dNTP son los componentes básicos del ADN. En la PCR, se agregan a la cadena de ADN que está construyendo la polimerasa.