¿Cuál es el propósito de la amplificación de ADN?

Si al decir AMPLIFICACIÓN DE ADN te refieres a la técnica de amplificación a través de PCR o RT-PCR, el propósito puede ser diferente.

Espero que ya sepas cómo funciona la PCR (el uso de un cebador directo e inverso que se unirá a una sola cadena y desencadenará esa ecc de polimerización de cadena).

Para que pueda amplificar para muchos propósitos:

  1. Para ver si su secuencia de interés está ahí: si ve productos de amplificación, puede decir que la secuencia que le interesa está allí. Si hace esto para investigar si su mRNa de interés se expresa, entonces es un RT-PCR
  2. Para ver si su secuencia de interés también se conserva en otro organismo o tejido: diseñe cebadores de baja rigurosidad que se unirán a la secuencia que es n% similar a su secuencia.
  3. Agregar marcador (como indicador / secuencia reconocida por las semillas, por ejemplo, avidina): puede diseñar su cebador que lleve consigo la secuencia o secuencia GFP / LacZ reconocida por el anticuerpo (HA, por ejemplo).
  4. Agregar secuencia de sitio de restricción: nuevamente puede diseñar su cebador para que contenga la secuencia que será escindida por la enzima de restricción (por ejemplo, EcoR1, BamH1 ecc)
  5. Para identificar regiones flanqueantes: si está utilizando un elemento transponible para inducir la mutación (por ejemplo, está utilizando el elemento P) y desea ver la secuencia cerca de su elemento P (por ejemplo, después de un Trapeo de Emhancer) puede usar un PCR inverso

Espero que esté claro (y lo que estaba pidiendo), si necesita alguna aclaración, escriba a continuación.

Hola…

Si está hablando de la aplicación a través de Polymerse Chain Reaction o PCR; El único propósito de dicha amplificación es simplemente visualizar el gen de nuestro interés, ya que no podemos visualizarlo ni cuantificarlo en un número de copias más bajo o en una concentración más baja. Al amplificar, solo concentramos las moléculas de ADN en un número deseado.

Solo hay una molécula de ADN en cada célula (o dos después de la replicación).

Si vamos a participar en procesos químicos que trabajan con ADN en el tubo de ensayo, solo una molécula es imposible e inadecuada para medir los resultados.

Por lo tanto, debemos aumentar o amplificar la cantidad de la secuencia objetivo a una cantidad de trabajo.

Esto se logra usando la reacción en cadena de la polimerasa, donde la secuencia objetivo se replica una y otra vez en un tubo de ensayo.

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