Esto depende de la proteína fluorescente. Al igual que con la densidad óptica, la intensidad de fluorescencia de un FP se escalará linealmente con la concentración; sin embargo, diferentes FP tienen diferente brillo molecular. El brillo molecular (MB) es una descripción de cuán eficiente es una molécula fluorescente para absorber un fotón incidente y luego reemitir un fotón como fluorescencia. Los valores más altos de MB significan una fluorescencia más fuerte.
MB = Φ * ε
donde Φ es el rendimiento cuántico , es decir, la fracción de fotones absorbidos que producen emisión de fluorescencia. Para EGFP es 0,6, lo que significa que el 60% de los fotones absorbidos se convierten en fluorescencia.
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ε es el coeficiente de extinción . Este valor describe qué tan buena es una molécula para absorber fotones. Conocer este valor es lo que hace que la ley de Beer-Lambert (A = εCL) sea útil para determinar las concentraciones por absorbancia. EGFP tiene un coeficiente de extinción de 56000.
Aquí hay una tabla de proteínas fluorescentes de uso común con sus características fotofísicas: fluorescent_proteins [NIC Wiki]. Como puede ver, algunos FP son extremadamente brillantes, mientras que otros lo son menos.
Hice mi tesis doctoral en un laboratorio donde diseñamos y aplicamos sondas fluorescentes para que estos factores siempre estuvieran en mente para mí.
