Solo uno, inicialmente.
Si crea un mouse mediante inyección de blastocisto, obtendrá un mouse quimérico entre sus descendientes. Como un porcentaje de las células de blastocistos llevaban el alelo knockout (KO), también lo hará un porcentaje de las células de ratón que llevan el alelo KO. Algunas de estas células KO se encuentran en las gónadas y, por lo tanto, son gametos (células sexuales) que transportan el alelo KO. Si luego cruzas este mouse con un mouse normal, obtendrás un cierto porcentaje de descendientes que se formaron a partir de gametos KO, lo que significa que contienen una copia KO del gen en cada célula de su cuerpo (los ratones blancos heterocigotos al final del diagrama).
Luego puede cruzar estos ratones heterocigotos entre sí para producir ratones homocigotos que contienen dos copias del gen KO.
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Nota: No tengo idea de por qué hay dos generaciones de quimera / cruces normales. Puede obtener ratones heterocigotos después de una generación de dicho cruce.