¿Cómo se usa el fenol en la extracción de ADN?

Hola.

La extracción con fenol es un proceso de laboratorio para purificar muestras de ADN.

En este método, una mezcla de TE (o ácido tris-etilendiaminotetraacético) y fenol se combina con un volumen igual de una muestra acuosa de ADN. Después de la agitación y la separación centrífuga, la capa acuosa se extrae y se procesa adicionalmente con éter. Luego, el ADN se concentra por precipitación con etanol.

La técnica de extracción con fenol a menudo se usa para purificar muestras de ácidos nucleicos tomados de las células. Para obtener muestras de ácido nucleico, la célula debe lisarse y los ácidos nucleicos deben separarse de todos los demás materiales celulares. El fenol es un compuesto útil para descomponer materiales celulares superfluos que de otro modo contaminarían la muestra de ácido nucleico.

Hay dos razones por las que el fenol es un purificador tan efectivo para muestras de ácido nucleico. El primero es que es un compuesto no polar. Debido a que los ácidos nucleicos son altamente polares, no se disuelven en presencia de fenol. El segundo es que el fenol tiene una densidad de 1.07 g / cm3, que es más alta que la densidad del agua (1.00 g / cm3). Por lo tanto, cuando se agrega fenol a una solución de muestra celular, el agua y el fenol permanecen separados. Se forman dos “fases” cuando se agrega fenol a la solución y se centrifuga. Hay una fase polar acuosa en la parte superior de la solución que contiene ácidos nucleicos y agua, y una fase orgánica que contiene proteínas desnaturalizadas y otros componentes celulares en el fondo de la solución. La fase acuosa siempre está por encima de la orgánica porque, como se mencionó anteriormente, el fenol es más denso que el agua. Los ácidos nucleicos son polares y, por lo tanto, permanecen en la fase acuosa, mientras que los componentes celulares no polares pasan a la fase orgánica.

Después de que se haya agregado fenol a la muestra, se centrifuga y se forman las fases acuosa y orgánica (“fenol”).

El fenol se usa a menudo en combinación con cloroformo. El propósito de agregar cloroformo junto con fenol es asegurar una separación clara entre las fases acuosa y orgánica. El cloroformo y el fenol se mezclan bien, a diferencia del fenol y el agua. La densidad del cloroformo es 1.47 g / cm3, mayor que la del agua y el fenol. La mezcla de cloroformo y fenol crea una solución más densa que el fenol solo y, por lo tanto, la separación de la fase orgánica de la acuosa es aún más clara que si solo se agregara fenol a una muestra de células. Hay menos contaminación cruzada de la fase orgánica en la fase acuosa. Esto es útil para cuando la fase acuosa se elimina de la solución para obtener una muestra de ácido nucleico puro.

Gracias.

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La diferencia de quimiocart

Los artículos de goma fenólica termoendurecible son los materiales más versátiles en el centro comercial y muchas empresas se benefician de su utilización. Cinco edades de los diseñadores de artículos en todo el mundo han llegado a depender con frecuencia de materiales basados ​​en alquitrán fenólico. Plastics Engineering Company se complace por nuestra historia que describe los materiales que han terminado la prueba del tiempo, independientemente de si se utilizaron como parte del creador de espresso matutino, el módulo lunar Apollo o los marcos de bienestar para automóviles más actualizados.

El mercado solicita mejoras de artículos personalizados a medida que las aplicaciones de chicle resultan ser más particulares. Sin embargo, el tipo de brea fenólica, su peso subatómico, monómero y sustancia húmeda, grosor o corriente líquida, pH, estimación de molécula, reactividad en medio del curado y nivel de descarga de vapor de curado son algunas de las propiedades que deciden la idoneidad de nuestros artículos para un cliente .

El objetivo central del grupo de chicles fenólicos de goma de mascar es crear, fabricar y administrar artículos útiles que den un claro incentivo a nuestros clientes. La participación y la capacidad de Plastics Engineering Company para elegir alternativas de definición de artículos y para utilizar una variedad de técnicas de ensamblaje permiten que los alquitranes de quimiocarta adapten los requisitos previos y los deseos de nuestros clientes. Respetamos la posibilidad de alterar un artículo de goma fenólica para su aplicación.

Plastics Engineering Company suministra novolacas modificadas y no ajustadas y elementos de brea fenólica resol como pastillas, polvos, astillas, irregularidades y fluidos solubles o a base de agua. Cuando todo está dicho, los clientes utilizan artículos de quimiocartistas para hacer rejillas de retención impenetrables con rellenos y sustratos, para dar forma a recubrimientos defensivos, para hacer espuma inflexible, como manantial de carbono indefinido o como sustancias añadidas que responden artificialmente.

¿Qué son las resinas fenólicas de quimiocart?

Los saps son polímeros hechos una y otra vez conectando átomos discretos (monómeros) para formar cadenas o sistemas. Los alquitranes fenólicos de quimiocart son oligómeros (polímeros con un par de unidades de rehashing) incorporados por más de una vez que conectan monómeros fenólicos (hidroxifragantes) con químicos aldehídos. La mayor parte de los artículos de quimiocart son mezclas de fenol (hidroxibenceno, C6H6O) y formaldehído (metanal, CH2O), sin embargo, las aplicaciones específicas pueden requerir la utilización de fenoles sustituidos (p. Ej., Cresoles, resorcinol, destilado líquido de cáscara de nuez de cajú) o diferentes aldehídos (p. Ej. , furfural). Los productores de alquitrán fenólico polimerizan fenol mediante la sustitución de formaldehído en el anillo de olor dulce del fenol por medio de una respuesta de acumulación. La determinación del parámetro de respuesta apropiado produce una diseminación ideal del peso subatómico y un contenido de monómero persistente vital para una efectividad extrema cuando el cliente lo utiliza. La amplia variedad de condiciones de respuesta y monómeros accesibles para el fabricante de la savia toma en consideración la generación de una variedad de sapas especialmente diseñadas para su uso en aplicaciones singulares.

Exhibimos la ciencia general de la polimerización de fenol con formaldehído, las partículas más conocidas utilizadas, para dar una base general de fabricación de goma.

En disposición fluida, el formaldehído existe en armonía con el metilenglicol.

Dependiendo del pH del impulso, estos monómeros responden a la forma de una de las dos escrituras de tono generales: RESINAS DE NOVOLAC y RESINAS DE RESOL.

Resinas Novolac

Un impulso ácido y una sobreabundancia molar de fenol a formaldehído son condiciones que se usan para hacer savia de novolaca. La ciencia desenmarañada que acompaña muestra la amplia variedad de polímeros concebibles. La respuesta subyacente es entre metilenglicol y fenol.

La respuesta procede con fenol extra y se separa del agua.

La respuesta hace que un metileno se conecte en la posición orto o en la posición para de los anillos fragantes fenólicos. La “directriz confiable” es que la posición para es aproximadamente dos veces más receptiva que la posición orto, sin embargo, hay dos veces el mismo número de ubicaciones orto (dos por cada átomo de fenol), por lo que las divisiones de orto-orto, para-para y orto -para los tramos se encuentran alrededor se encuentran.

La difusión ocurre a la luz del hecho de que la respuesta puede ocurrir en cualquiera de los tres destinos de cada anillo. A medida que avanza la respuesta, las introducciones irregulares y el estiramiento rápidamente dan como resultado una mezcla compleja en gran medida de polímeros de diversos tamaños y estructuras. La respuesta se detiene cuando el reactivo de formaldehído se agota, rindiendo regularmente más del 10% de fenol no respondido. La refinación de la savia líquida en medio del ensamblaje evacua el exceso de fenol y agua.

La última savia de novolac no puede responder promocionar sin la expansión de un especialista en conexión cruzada. Chemocart novolac encías acompañan y sin un especialista en curado. Los lanzamientos que tienen el operador de curado fusionan el curado o “termoestable” en el grado deseado cuando son manejados por el cliente.

Dado que se requiere un especialista adicional para terminar la curación del tono, la industria alude regularmente a los alquitranes de novolaca como elementos de “dos fases” o “dos avances”. El operador de conexión cruzada de savia fenólica más conocido es la hexametilentetramina, también llamada hexa, hexamina o HMTA. Molido y mezclado con la goma, el hexa se convierte en una fuente ventajosa de formaldehído cuando se calienta a temperaturas de embellecimiento y curado. Una calidad excepcional de hexa es que responde directamente con savia y fenol sin crear medidas aparentes de formaldehído libre. Hexa cura la savia conectando y polimerizando adicionalmente las partículas a un estado infusible. Debido a los bordes de enlace y los diversos destinos de respuesta relacionados con la ciencia de la respuesta, el polímero posterior no es una cadena recta larga, sino más bien un sistema de polímero tridimensional desconcertante de peso atómico escandaloso. Este sistema de retención firmemente curado de fenólicos de olor dulce representa la dureza de los materiales curados y el calor y las propiedades seguras solubles.

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La extracción con fenol es un método comúnmente utilizado para eliminar proteínas de una muestra de ADN, por ejemplo, para eliminar proteínas del lisado celular durante la preparación del ADN genómico.

Fenol utilizado en la extracción de ADN mediante el siguiente proceso.

Primero, se agrega un volumen de fenol a la sopa acuosa que contiene las proteínas y el ADN a purificar.

Como el fenol y el agua son inmiscibles, se forman dos fases: una fase de agua (también conocida como acuosa) y una fase de fenol. El fenol es el más denso de los dos líquidos, por lo que se encuentra en el fondo.

Las fases se mezclan luego a fondo. Esto fuerza al fenol a la capa de agua donde forma una emulsión de gotitas por todas partes. Las proteínas en la fase acuosa se desnaturalizan y se reparten en el fenol, mientras que el ADN permanece en el agua.

Luego, la mezcla se centrifuga y las fases se separan. La fase acuosa que contiene ADN ahora se puede pipetear y la solución de fenol / proteína se descarta. Comúnmente, el ADN se desaló luego y se concentró usando precipitación con etanol

El fenol es un solvente orgánico que se une a las proteínas y las desnaturaliza, ya que el ADN es rico en esqueletos de fosfato, esto hace que la interacción con el fenol sea imposible, lo que hace que el ADN se precipite entre sí, al igual que colocar una gota de aceite en agua, compuestos inorgánicos como el fosfato no se disolverá en solventes orgánicos y viceversa, luego se agregará cloroformo para eliminar el fenol, lo que ahora causará que el ADN permanezca en la fase acuosa debido a la interacción fosfato y agua.