No estoy muy seguro de lo que quieres decir con “prueba de cromosomas“, pero supondré que te refieres al análisis de cromosomas. Tradicionalmente, los cromosomas se han estudiado observando su comportamiento bajo el microscopio óptico. Esto permitió que el cariotipo de un organismo se formara combinando cromosomas homólogos para poder identificar el número básico de cromosomas y estimar la ploidía de la célula (cuántas copias de cada cromosoma único hay). Información bastante esencial para cualquier especie. El problema con esto fue identificar cada cromosoma único. Si confiamos únicamente en la morfología, solo podemos determinar el tamaño del cromosoma, la posición del centrómero y cualquier característica inusual, como satélites o regiones de tinción de luz. Este fue un gran problema al analizar el cromosoma humano porque los principales grupos de muy similares. Por esta razón, se pensó que inicialmente había 48 cromosomas en lugar de 46. Este problema se resolvió mediante el desarrollo de técnicas de bandas que permitieron identificar los cromosomas individuales por la cantidad de bandas que tiene cada uno. De hecho, hoy los cromosomas humanos están subdivididos por sus brazos (p – parte superior del brazo y q – parte inferior del brazo), y el número de bandas en cada uno. La ubicación de los genes en los cromosomas se logró originalmente mediante el mapeo de enlaces, pero en estos días podemos usar técnicas de hibridación in situ como la hibridación fluorescente in situ (FISH) para identificar la ubicación de un gen a lo largo de un cromosoma. Podemos usar técnicas de pintura cromosómica para identificar cromosomas individuales (usando FISH con sondas de hibridación específicas para cromosomas individuales). Para nombrar sólo unos pocos. Para cromosomas pequeños (los de bacterias y hongos) podemos usar electroforesis. La técnica utilizada aquí se llama electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE), como CHEF. Esta técnica permite la separación de moléculas grandes al cambiar la dirección de la corriente durante la electroforesis para que el proceso se asemeje al uso de un tamiz. La molécula más grande a ser separada por PFGE es de aproximadamente 12 Mbp, lo cual está bien para las bacterias y las células de levadura, pero no lo suficientemente bueno para los humanos (el cromosoma humano más pequeño mide aproximadamente 4–5 veces el tamaño de este). Por supuesto, podemos secuenciar cromosomas rápidamente en estos días utilizando técnicas de secuenciación de tercera generación, que es el mapa genético definitivo.
¿Cuáles son ejemplos de una forma convencional de prueba y pruebas modernas de cromosomas?
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Llevo mucho tiempo fuera del laboratorio, pero hace 25 años, el lote de citogenética de al lado de mi antiguo laboratorio de genética molecular estaba muy interesado en FISH.
Hibridación fluorescente in situ – Wikipedia
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