FRET se basa en la transferencia de energía entre un donante y un aceptador: cuando el donante y el aceptador están en proximidad cercana, la excitación del donante se transfiere en parte al receptor que luego fluoresce.
La eficiencia de transferencia disminuye muy rápidamente con la distancia entre las dos moléculas y, por lo tanto, la eficiencia de FRET es una buena medida de su proximidad. Sin embargo, generalmente es bastante difícil anticipar si la disposición de dos biomoléculas yuxtapondrá el par donante / aceptor de una manera que sea productiva para FRET.
Yo diría que:
– detectar FRET es una buena indicación de proximidad física y, por lo tanto, de interacción entre moléculas.
– La ausencia de FRET no indica que las moléculas no interactúen, podrían estar dispuestas de manera no productiva para FRET dentro del complejo.
– Finalmente, la pérdida de FRET por cambios en las condiciones (adición de un competidor / medicamento …) indica de hecho una pérdida de interacción.
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