El número de nucleótidos en un ácido nucleico se puede determinar de varias maneras:
- la manera fácil: electroforesis en gel de agarosa. Esto separa las moléculas de ADN de acuerdo con su longitud. Al ejecutar junto con una solución estándar que contiene una mezcla de moléculas de ADN de longitud conocida, se puede dibujar una curva estándar del registro de longitud de ADN frente a la distancia migrada en el gel (medida con una regla). El tamaño de lo desconocido (generalmente en pares de bases) se puede conocer rápidamente al trazar la distancia que el desconocido migró en el gel a la curva estándar. Se utiliza para aplicaciones rutinarias, cotidianas, donde el tamaño exacto de la molécula de ADN no es realmente necesario.
Ejemplo de un gel de agarosa. El estándar está en el extremo izquierdo (de [1] ).
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Usando una curva estándar para determinar el tamaño de una molécula de ADN desconocida (de [2] ).
2. Métodos más complicados (generalmente secuenciación de ADN). El ADN se somete a una reacción de síntesis in vitro que se detiene al azar mediante un nucleótido marcado modificado. Esto produce una mezcla de fragmentos de ADN, que se pueden separar por electroforesis en gel. Más tedioso / costoso, pero también más preciso que la electroforesis en gel de agarosa.
Ejemplo de un gel de secuenciación de ADN (de la vieja escuela) (de [3] ) .
Notas al pie
[1] sin título
[2] sin título
[3] secuenciación de ADN