Hay varias enzimas utilizadas en ingeniería genética:
- Exonucleasas : que eliminan los nucleótidos de uno en uno desde el extremo terminal de una cadena de ADN. P.ej. Exonucleasa III (elimina del extremo 3 ‘del dsDNA), Bal31, nucleasa S1, etc.
- Endonucleasas de restricción: son las más comunes en el campo de la ingeniería genética. Rompen los enlaces internos del fosfodiéster dentro de las cadenas de dsDNA. La mayoría de las enzimas de restricción de tipo II se usan y tienen sus sitios objetivo específicos. Se encuentran disponibles alrededor de 600 enzimas de restricción diferentes que se obtienen de diferentes bacterias y arqueas. Por ej. EcoRI, HindIII, BamHI, SmaI, etc.
- ADN polimerasas: generalmente se usa ADN polimerasa I. Otros incluyen fragmentos de klenow, taq polimerasa, pfu pol, etc.
- ADN ligasa: generalmente obtenida de dos fuentes: E.coli y fago T4. Catalizan la formación de enlaces fosfodiéster. Otras ligasas son la ADN ligasa I y la ADN ligasa IV .
- Transcriptasa inversa: es una ADN polimerasa dependiente de ARN. Obtenida de virus oncogénicos como el mieloblastocisto aviar, el virus del linfoma de células T humanas, etc.
Otras enzimas modificadoras utilizadas son:
- Fosfatasa alcalina: eliminan el grupo fosfato del extremo 5 ‘del ADN.
- Transferasa terminal: agregue nucleótidos al extremo 3 ‘del ADN.
- Polinucleótido quinasa: agregue el grupo fosfato gamma del ATP al extremo 5 ‘libre del ADN.
- Metilasas: metilan generalmente nucleótidos de adenina y citosina.
Estas son algunas de las enzimas más comunes utilizadas en diferentes aspectos de la ingeniería genética.
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