Cómo hacer PCR sin un termociclador

Una función del ciclador térmico es cambiar las temperaturas según sea necesario. Como lo describió Ian Driver. Solo necesita establecer baños de agua a cada temperatura que establecería en un termociclador y obtener un cubo de hielo también.

Echa un vistazo a algunos de los trabajos de la Dra. Eva Harris en UC-Berkeley. Ella ayudó a establecer reacciones moleculares (para el diagnóstico) en una zona rural de Nicaragua al hacer PCR sin un termociclador.

La cosa es que, aunque es factible, es realmente innecesaria. Hoy en día tiene muchas opciones para hacer una reacción en cadena de la polimerasa sin gastar mucho dinero:

  • Obtenga un termociclador usado. Mucho más barato. Sin embargo, evite los que no tienen tapa calentada. Demasiada molestia eliminando el aceite de la reacción.
  • Las organizaciones pueden obtener equipos donados. Cuando un laboratorio con recursos compra un nuevo termociclador, a menudo donan el viejo. En algún momento, inicié las conversaciones para obtener un viejo electroporador donado de una institución estadounidense a una incipiente institución de investigación en El Salvador.
  • Existe este sitio web para cicladores térmicos caseros (probablemente no se publicará utilizando uno de estos, pero puede ser una fuente de interminables horas de entretenimiento). Echa un vistazo a este sitio web: la máquina de PCR de código abierto de $ 649 / termociclador
  • Además, puede hacer el suyo usando un arduino (pero tiene que hacer la programación. Es más fácil obtener un kit de OpenPCR.

Configure 3 baños de agua o bloques de calor ~ 95 ° C (activación si el arranque en caliente o el deshielo de fusión) ~ 50-60 ° C (recocido) y 72 ° C (extensión) y siéntese allí con un temporizador durante una o dos horas moviendo sus tubos desde una temperatura a otro. Termociclador alimentado por humanos. Todas las reacciones de PCR iniciales se realizaron de esta manera ya que los termocicladores no existían en ese entonces. Si quieres revivir los viejos tiempos o simplemente te sientes masoquista, pruébalo.