Biofísica: ¿Será la microscopía forzada, la RMN o la fluorescencia la técnica más importante para estudiar la dinámica biomolecular en el futuro, y qué técnica se saturará y desaparecerá?

No creo que ninguna de estas técnicas se extinga.

La fluorescencia es claramente la herramienta más poderosa, pero en realidad no es una herramienta completa en sí misma. Realmente es solo un reportero versátil. Puede usar fluorescencia con microscopía de fuerza, por ejemplo.

La RMN ya es un campo muy maduro, pero creo que están ocurriendo muchas innovaciones nuevas y es una herramienta increíblemente poderosa. Usando RMN, básicamente puede monitorear una gran cantidad de sondas (es decir, casi todos los átomos de hidrógeno) simultáneamente. Especialmente a medida que las herramientas de predicción de cambios químicos continúan madurando, la información estructural que puede obtener de la RMN se vuelve cada vez más poderosa. Otra cosa única y poderosa sobre la RMN es que no es perturbadora. Cuando conecta sondas de fluorescencia o tira de manijas a una molécula, nunca está 100% seguro de que no estén perturbando la actividad o la dinámica de la proteína / biomolécula de tipo salvaje real de interés.

La microscopía de fuerza puede ser la más limitada, pero es un campo terriblemente joven, por lo que todavía hay mucho que aprender de él. La fuerza es un “desnaturalizante” realmente único, y creo que las ideas de la espectroscopía de fuerza, tanto las similitudes como la diferencia entre la respuesta de fuerza y ​​la respuesta química de desnaturalización, arrojarán mucha luz sobre cuáles son las características generales de los sistemas no perturbados. son. En particular, la biofísica fundamental de los desnaturalizantes químicos es poco conocida, a pesar de que son herramientas experimentales ubicuas. La fuerza se entiende mucho mejor desde un punto de vista reduccionista, lo que hace que la simulación / teoría de conexión y los experimentos basados ​​en la fuerza sean mucho más directos. Esto es bueno para experimentadores y teóricos por igual.

Si por dinámica te refieres a los movimientos dentro de las proteínas individuales, la respuesta es claramente RMN. Nada más se acerca remotamente o es probable que lo haga en un futuro cercano. Se ha propuesto la difracción de rayos x resuelta en el tiempo, pero sigue siendo limitada en la aplicación.
Si por dinámica te refieres a la dinámica temporal de las interacciones proteína-proteína y lípido-proteína en las células vivas, entonces la microscopía de fluorescencia es la única opción real ya que la mayoría de las otras técnicas biofísicas no funcionan en las células vivas.

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