¿Desventajas en relación con otros métodos de edición del genoma? Honestamente, actualmente es el método de edición genómica más simple, preciso y versátil que tenemos. La precisión es clave aquí: otros métodos, como el uso de productos químicos / radiación para inducir mutaciones, pueden tener efectos indeseables fuera del objetivo.
La eficiencia también es clave. Antes de la llegada de CRISPR, el método de vanguardia para la ingeniería genética de las células eucariotas era la eliminación de ratones (que todavía se usa mucho en la actualidad). Al igual que CRISPR, la tecnología tradicional de ratones knockout es una técnica específica de selección de genes que revolucionó la investigación biomédica. En pocas palabras (como realmente en pocas palabras), el procedimiento de ratones knockout implica la mutación de células madre de ratón, inyectándolas en un embrión de ratón, uniendo el ratón resultante (que tiene algunas células mutantes y algunas células normales) con otro ratón, y luego Selección de la descendencia resultante para la mutación deseada.
Obviamente, esta cría intergeneracional de ratones lleva mucho tiempo. Con CRISPR / Cas9, no tiene que pasar por ese laborioso proceso multigeneracional para producir su organismo mutante deseado. El método tradicional de crear organismos eliminados implica múltiples generaciones porque se basa en la recombinación homóloga entre el genoma de células madre de tipo salvaje y el ADN mutante que ha inyectado en las células madre. Después de eso, estás criando ratones con la esperanza de obtener un ratón que tenga ambas copias mutantes de tu gen de interés. Con CRISPR, puede obtener su organismo mutante deseado en una generación. CRISPR le ahorra el trabajo / tiempo de detección de mutantes y las múltiples generaciones posteriores de reproducción.
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Me doy cuenta de que comencé esta respuesta pintando CRISPR y ratones knockout como mutuamente excluyentes. No lo son Más bien, CRISPR permite un ajuste fino sin precedentes de la manipulación genética, que puede emplearse en el procedimiento de eliminación de ratones.