¿Cuáles son las mayores desventajas de usar CRISPR / Cas9 para la edición del genoma?

¿Desventajas en relación con otros métodos de edición del genoma? Honestamente, actualmente es el método de edición genómica más simple, preciso y versátil que tenemos. La precisión es clave aquí: otros métodos, como el uso de productos químicos / radiación para inducir mutaciones, pueden tener efectos indeseables fuera del objetivo.

La eficiencia también es clave. Antes de la llegada de CRISPR, el método de vanguardia para la ingeniería genética de las células eucariotas era la eliminación de ratones (que todavía se usa mucho en la actualidad). Al igual que CRISPR, la tecnología tradicional de ratones knockout es una técnica específica de selección de genes que revolucionó la investigación biomédica. En pocas palabras (como realmente en pocas palabras), el procedimiento de ratones knockout implica la mutación de células madre de ratón, inyectándolas en un embrión de ratón, uniendo el ratón resultante (que tiene algunas células mutantes y algunas células normales) con otro ratón, y luego Selección de la descendencia resultante para la mutación deseada.

Obviamente, esta cría intergeneracional de ratones lleva mucho tiempo. Con CRISPR / Cas9, no tiene que pasar por ese laborioso proceso multigeneracional para producir su organismo mutante deseado. El método tradicional de crear organismos eliminados implica múltiples generaciones porque se basa en la recombinación homóloga entre el genoma de células madre de tipo salvaje y el ADN mutante que ha inyectado en las células madre. Después de eso, estás criando ratones con la esperanza de obtener un ratón que tenga ambas copias mutantes de tu gen de interés. Con CRISPR, puede obtener su organismo mutante deseado en una generación. CRISPR le ahorra el trabajo / tiempo de detección de mutantes y las múltiples generaciones posteriores de reproducción.

Me doy cuenta de que comencé esta respuesta pintando CRISPR y ratones knockout como mutuamente excluyentes. No lo son Más bien, CRISPR permite un ajuste fino sin precedentes de la manipulación genética, que puede emplearse en el procedimiento de eliminación de ratones.

Las otras respuestas dan respuestas académicas y basadas en la ciencia, pero pierden el punto más importante: la libertad de operar y los problemas de propiedad intelectual.

Dada la actual lucha de patentes y algunas restricciones de licencia establecidas por las partes actuales, el uso de otras tecnologías de edición, incluso con todas sus desventajas, puede ser mucho menos incierto si se va a comercializar un producto.

¿Por qué el MIT posee la patente cuando Berkeley tuvo un papel fundamental para inventar CRISPR Cas9?

El sistema CRISPR / Cas9 es casi superior en casi todos los sentidos, científica y técnicamente sobre TALEN, nucleasas con dedos de zinc y meganucleasas personalizadas por muchas razones que puede encontrar en otros lugares. La realidad regulatoria actual y el historial de uso (tan breve y limitado como lo ha sido) con las otras tecnologías es lo que los mantiene vivos.

Las mutaciones fuera del objetivo y las limitaciones de las secuencias que pueden ser dirigidas (particularmente debido al requisito PAM NGG) también son importantes, pero secundarias para muchas compañías.

Depende de lo que quieras decir con “práctico”. CRSIPR / Cas9 en comparación con otras herramientas de edición de genes como TALEN, ZFN es más fácil de usar, no requiere procesos de fabricación que consumen mucho tiempo y es fácil de entregar. También se puede modificar para no solo editar un gen simplemente “cortándolo”, sino que también se puede diseñar para proporcionar activación o represión transcripcional (fusionando un Death-Cas9 a dominios como el dominio VP64 o KREB). La “impracticabilidad” de Cas9 se basa en los problemas fuera del objetivo (que afecta también a los ZFN y TALEN), un bajo número de células editadas en una sola toma que hacen que Cas9 aún no sea 100% aplicable a la terapia génica, por ejemplo. Pero todos los días se publican nuevos artículos que sugieren un enfoque novedoso para hacer que CRISPR / Cas9 sea más preciso y seguro para la terapia génica.

CRISPR está haciendo grandes olas en biología, y por una buena razón; Las puertas de la ingeniería genética ahora están abiertas de par en par.

Los impulsos genéticos son una nueva forma radical de eliminar enfermedades transmitidas por insectos como el zika, el dengue y la malaria, mediante la ingeniería de la composición genética de especies enteras.

Desventajas

  • Las secuencias objetivo pueden estar limitadas debido a las secuencias PAM
  • Secuencias fuera del objetivo podrían ser posibles

Una parte relativamente pequeña pero no significativa del tiempo, los nucleótidos que guían el complejo crispr cas a su posición en el ADN objetivo terminan uniéndose a una secuencia que en realidad no complementan, y luego se inserta en un lugar en el genoma que No querías Es bastante raro que pueda usar crispris para hacer mutantes deseados para ser utilizados como animales de investigación, pero también es lo suficientemente común que no puede usar crispris para editar el genoma de una persona viva para curar una enfermedad sin arriesgar problemas como el cáncer.

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