En genómica, utilizamos vectores plasmídicos en clonación y biotecnología industrial.
Un plásmido es una molécula de ADN bicatenario, de forma pequeña y circular y distinta del ADN cromosómico de la célula en que se replican independientemente.
Los plásmidos utilizados en el laboratorio generalmente son artificiales y están diseñados para introducir ADN extraño en otra célula.
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En la investigación de la clonación, los fragmentos de ADN se insertan en un vector plasmídico, creando un plásmido recombinante.
Los vectores de expresión también se conocen como construcción de expresión porque estos vectores plasmídicos se crean artificialmente en el laboratorio.
Usualmente, el uso de una enzima de restricción se emplea cuando se clona por restricción y ligadura.
Las enzimas de restricción se usan para abrir un plásmido para insertar un fragmento lineal de ADN. La enzima ADN ligasa se une covalentemente al plásmido al nuevo fragmento generando un plásmido circular completo que puede mantenerse fácilmente en la mayoría de las arqueas y eucarias.
En la industria, el plásmido se denomina columna vertebral y el fragmento lineal de ADN como inserto .
Supongo que para responder realmente a su pregunta ahora que he establecido algunos antecedentes fundamentales, cualquier buen vector es puro, después de haber pasado por la purificación en gel.
El protocolo de purificación en gel le permite aislar y purificar fragmentos de ADN según el tamaño. El procedimiento comienza con la electroforesis en gel de agarosa estándar, que separa el ADN por su longitud en pares de bases.
Después de la electroforesis, puede cortar bandas de ADN del gel de agarosa y purificar las muestras de ADN. Esta es una técnica de uso común para la clonación molecular, como la PCR o la clonación basada en enzimas de restricción.
Proporcionaré algunos enlaces para lecturas adicionales en vectores de plásmidos y clonación si está interesado.
plásmido / plásmidos
Elegir tu columna vertebral de plásmido perfecto
Cómo purificar el ADN de un gel de agarosa
¡La mejor de las suertes!
