¿Cómo se realiza la reacción en cadena de la polimerasa (en un proceso completo detallado)?

Hola !!

Supongo que eres estudiante de 12º grado de CBE. Así que voy a responder en consecuencia como mi maestro me dijo en el formato exacto. Si este no es el caso, por favor informe y editaré la respuesta en consecuencia.

PCR: la reacción en cadena de la polimerasa es un proceso para la amplificación y / o detección del contenido de ADN.

Karry Mullis es el fundador de este proceso y lo hizo en el año 1985.

Requisitos para la PCR:

  1. Contenido de ADN
  2. dNTP (diNucleotidetrifosfatos)
  3. Imprimaciones
  4. ADN polimerasa dependiente de ADN (polimerasa Taq)
  5. Tampón que tiene Mg2 +

La PCR es un proceso de tres pasos:

  1. Desnaturalización por calor : este proceso se realiza entre una temperatura de 92 ° C a 94 ° C. Esto es para romper los enlaces de hidrógeno entre AT y CG. (Este proceso lo lleva a cabo la enzima helicasa, pero es una enzima costosa y, por lo tanto, usamos la temperatura para romper los enlaces).
  2. Recocido : Este proceso se realiza entre una temperatura de 56 ° C. Esta disminución de la temperatura se realiza para permitir que los cebadores se unan a la cadena de ADN. (En el filamento 5 ‘, el cebador se adhiere en la dirección inversa para que el proceso de polimerización no cause fragmentos de okazaki. Este cebador se llama cebador inverso y en el filamento 3’ el cebador se adhiere normalmente y, por lo tanto, se llama cebador directo)
  3. Polimerización: este proceso se realiza a una temperatura de 72 ° C. La polimerasa Taq varía el proceso de polimerización.
  4. La repetición de los procesos 1 a 3 nuevamente hasta 30 veces hasta que se haya obtenido una buena cantidad de ADN. El ADN luego se desenrolla y se usa de acuerdo con los requisitos.

Espero que hayas entendido mi explicación.

Editar: Punto agregado no. 4 4

Gracias por señalarlo Dhaval Bhatt