Una vez que se estableció que los codones consisten en conjuntos de tres nucleótidos, ¿qué enfoque utilizaron Nirenberg y Matthaei para comenzar a descifrar el código? ¿Cuál fue el primer codón que descifraron?

Matthaei creó artificialmente polinucleótidos de ARN y comenzó un experimento para verificar el efecto de poli (A), poli (U), poli (2A) U y poli (4A) U. Agregó los 20 aminoácidos radioactivos al tubo de ensayo. Encontró un aumento de 12 veces en la radioactividad en el producto proteico después de la incubación con poli (U), un pequeño aumento con poli (AU), y apenas hubo cambios con poli (A). Matthaei tuvo que detectar qué aminoácido radiactivo se incorporó, tiene que probarlo sistemáticamente. Lo hizo colocando versiones regulares de 10 aminoácidos y 10 aminoácidos radioactivos y luego realizó el mismo experimento de poli (U). Si hubo un aumento en la radioactividad, entonces indicó que se había incorporado uno de los aminoácidos radioactivos. Por lo tanto, se redujo a dos aminoácidos: fenilalanina y tirosina.

Matthaei realizó el experimento final, que incluyó 10 tubos de ensayo. En el tubo 3 tenía 19 aminoácidos sin marcar con fenilalanina radiactiva y en el tubo número 8, tenía tirosina radiactiva con los 19 aminoácidos restantes sin marcar. Los 8 tubos restantes eran varios controles. La mezcla se incubó a 36 grados centígrados. El tubo 3 contenía fenilalanina radiactiva, una proteína producida con una radioactividad que era 20 veces mayor que los tubos de control. Mientras que el tubo con tirosina no mostró aumento en la actividad de radio.

Todo el experimento es un sistema libre de células, lo que lo hace ingenioso. Se puede crear un sistema libre de células rompiendo una célula y liberando su contenido. La savia aún puede sintetizar proteínas cuando se proporciona ARN apropiado. Nirenberg y Matthaei eligió ir con E. coli.

Referencias

Sección de Historia: Poly-U

El mayor secreto de la vida: la carrera para descifrar el código genético por Matthew Cobb